Metodología de la investigación
Se llevó un proceso de investigación sistemático para
la caracterización hídrica de laguna de oxidación,
identificación de puntos de muestreo y análisis de
método físico, químico y biológico con ayuda de la
guía descrita en el Protocolo Nacional para el
Monitoreo de la Calidad de los Recursos Hídricos
Superficiales.
El análisis de laboratorio incluyó la toma de muestras
puntuales para determinar los sólidos suspendidos
totales (SST) y coliformes totales. Mientras que los
niveles de pH, salinidad, temperatura y conductividad
se determinaron in-situ.
Técnicas e instrumentos de obtención de datos
Materiales y equipos utilizados
Para la determinación del nivel de pH, temperatura,
conductividad, SST y salinidad se empleó el equipo
multiparamétrico.
Para coliformes fecales y Escherichia coli se
emplearon caldos de cultivo cómo el caldo lauril
sulfato, caldo verde brillante y caldo EC
respectivamente.
Además, se emplearon los EPPs como los guantes
quirúrgicos, cofia, botas, guardapolvos y otros para la
protección adecuada durante el trabajo de recolección
de muestras y laboratorio.
También se utilizó materiales como wincha, libreta de
campo, tubos de ensayo y Durham, papel Kraft, asa de
inoculación, algodón, gradilla, mechero y entre otros.
Así mismo como el autoclave, balanza analítica,
equipo multiparamétrico y estufa eléctrica.
Procedimientos de fase de pre campo y campo
Primero se reconoció bien el lugar de muestreo con los
respectivos EPPs, para de esa forma extraer alícuotas
simples que nos permitieron determinar los niveles de
pH, salinidad, temperatura, conductividad, SST y
coliformes fecales.
Procedimientos de recolección de muestras
En el pozo de oxidación se ubicó el punto de
vertimiento del efluente, de dicho punto se midió 50
metros aguas arriba (A) de donde se recolectó una
muestra y 200 metros aguas abajo (B) del río Upamayo
de donde se extrajo otra muestra.
Parámetros medidos ex-situ
Sólidos Suspendidos Totales
Para esto se empleó una filtración al vacío. Se
midieron 250 ml de muestra de agua y se filtraron
lentamente a través del papel filtro. Es importante
precisar que el papel filtro se pesó antes y después de
ser filtrado, para que de esa manera determinar el peso
final de los sólidos suspendidos (≥0,45 micras).
Coliformes Totales
Esta es una prueba presuntiva que nos permite
seleccionar una muestra de referencia.
Para ello, se prepara el medio de cultivo (caldo) en
razón a 35,6 g de polvo de caldo lauril sulfato en 1 litro
de agua.
Luego, en 9 tubos de ensayo con tubos Durham se
llenan 10-1, 10-2 y 10-3 ml de caldo, se esterilizaron,
se inocularon con la muestra de agua y ayuda del asa
de siembra y se incubaron por 24 horas.
Posteriormente, se selecciona la muestra positiva con
el cual se determinan los coliformes fecales y
Escherichia coli.
a) Coliformes fecales
Para la preparación de este caldo se pesó 40 gramos de
polvo de caldo verde brillante en 1L de agua destilada.
Posterior a ello, en 9 tubos de ensayo con tubos
Durham se llenan 10-1, 10-2 y 10-3 ml de caldo, se
esterilizan, se inoculan con la muestra positiva de la
prueba presuntiva y se incuban durante 24 horas.
Luego se determinan la cantidad coliformes fecales en
razón al número más probable por cien (NMP/100).
b) Escherichia coli (EC)
Para este proceso lo primero que se hizo fue la
preparación del caldo EC, para ello se hizo hervir 400
ml de agua más 14 gramos de caldo EC. Se puso en la
estufa eléctrica hasta que este entre a su punto de
ebullición. Posterior a ello, en 9 tubos de ensayo con
tubos Durham se llenan 10-1, 10-2 y 10-3 ml de caldo,
se esterilizan, se inoculan con la muestra positiva del
caldo verde brillante y se incuban durante 24 horas.
Luego se determina la cantidad de EC (NMP/100).
Parámetros medidos in-situ
Los parámetros como Temperatura, potencial de
hidrógeno, conductividad y salinidad fueron medidos
in-situ con el equipo multiparamétrico de medición.